操做液相色谱时影响保留时间的变化的因素有哪些?高效液相色谱保留时间影响因素

2024-01-13 03:33:00 文章来源 :网络 围观 : 评论

  

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  影响液相色谱保留时间的因素:

  1、流动相的比例与极性。对于不同的柱子,分离度和保留时间往往都会有点差别,所以在操作的时候:a、可以适当调整流动相的比列,如甲醇—水(90:10),如分离效果与保留时间延长,可以调整88:12或者92:8或者95:5等。b、有时候还需要更换流动相的组成,甲醇就可以换成乙腈,看具体的实际操作而定。

  2、柱子与柱温。不同的柱子保留时间会有所差别,主要是载体的吸附性和固定液的纯度不同,但保留时间一般不会相差太大,可以根据对照品或者标准品的保留时间指定。柱温在HPLC操作时,一般就调整到室温或者30度。

  3、流速。流速的大小,液相色谱一般调整在0.8mL/min或者1.0mL/min。

  4、进样量。进样量大,保留时间往往会延长。

  5、输液系统的压力,当高压流动相通过层析柱时,可降低样品在柱中的扩散效应,可加快其在柱中的移动速度,保留时间将会缩短。具体的影响因素还要在实际操作中慢慢考察,经过调整后才可以的到较好的色谱条件。

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